데이비드 카루소(David Caruso) - 호레시오 케인, 3급 감식 수사관(반장).
마이애미 범죄수사국 경위. 방화, 폭발사건 전문이며, 다양한 관점에서 사건을 분석하는데 능하다. 마이애미 출신. 어머니로부터 진정한 힘은 지혜이지 주먹이 아니라고 배웠다. 어머니가 마약밀매상에게 죽임당하자 경찰을 도와 사건을 조사하여 가해자를 찾아내었고, 가해자는 법에 따라 종신형을 받았다. 이 사건을 계기로 경찰학교에 진학했으며,과학수사에 관심을 갖게 되어 마이애미 주립대학교에서 화학을 공부했다.

에밀리 프록터 (Emily Procter) - 캘리 드퀘인, 3급 감식 수사관.
물리학 전공, 탄도학 전문가로 루이지애나 주 출신이며 그의 부친과 모친 모두 알코올 의존중 환자였다.총기류에 해박한 지식을 갖고 있어 별명이 '총알 여인(Bullet Girl)'이다.
CSI 내에서의 서열은 대략 호레시오 케인 바로 아래. 호레이쇼 케인 부재시 임시 반장의 역할을 수행하기도 한다, 한마디로 호레시오가 반장이면 켈리는 부반장이라고 이해하면 되겠다.

애덤 로드리게즈(Adam Rodriguez) - 에릭 델코, 3급 감식 수사관.
자비를 실천해온 어머니의 영향으로 남을 돕는 삶이 가치있는 삶이라고 생각하여 경찰 학교에 진학하였다. 엘리트 경찰인 에릭의 호기심과 직관력을 발견한 호레이쇼 수사관이 반장 직을 맡자마자 에릭을 과학수사대로 임명한다. 전문분야는 스페인어, 약물학등이라고 하나, 가장 인상깊은 특기는 수중 탐색으로 원래 마이애미 데이드 경찰의 전문 다이버 출신이며 정의감이 강한 인물이다.

로리 코크레인 (Rory Cochrane) - 팀 스피들 , 3급 감식 수사관 (시즌 1 - 3, 시즌 6.)

시즌 3 초반에서 범인과의 총격전으로 순직하였다. 시즌 9에서 순직한 제시 카르도자와는 동료 사이였다. 이후 라이언 울프 수사관이 후임으로 들어왔다.

조너선 토고 (Jonathan Togo) - 라이언 울프 , 3급 감식 수사관 (시즌 3 ~ ).
시즌 3에서 스피들 사후 사건 현장에서 만나게 된 경찰관으로 과학수사대에 들어가고 싶어 틈틈이 공부를 해온 열정과 꼼꼼한 성격이 호레이쇼 반장의 호감을 사 영입되었다. 강박장애가 있는 라이언 수사관은 팀내 막내였음에도 자기 위인 에릭에게 자주 대들어 갈등을 빚는 일이 자주일어난다.

에디 시브리언 (Eddie Cibrian) - 제시 카르도자, 2급 감식 수사관 (시즌 8 - 9)
과학수사대가 창설되기전 호레시오 밑에서 일하던 형사었지만 과학수사대가 창설되자마자 그는 로스앤젤레스(LA)로 근무지를 옮겼다. 시즌 8부터 다시 마이애미로 돌아와서 과학수사대에 합류한다. 어려운 일을 겪는 동료를 돕는 인간적인 수사관이며, 평소엔 신사적이나 불의를 보면 참지 못하는 정의감이 강한 성격이다. 시즌 9 첫 에피소드에서 뇌출혈과 심장마비로 인해 순직하였다.

오마르 벤슨 밀러 (Omar Benson Miller) - 월터 시몬스, 1급 감식 수사관 (시즌 8 ~ )
 루이지애나 주 출신으로 미술품 도난 전문가이다. 경찰서 밤 교대 근무자로 일하다가 시즌 8부터 호레시오 팀에 합류하게 되었다. 뚱뚱하고 여린 외모라 끈기가 없어보이지만, 자신이 맡은 일에 대해서는 끝까지 파고들어 뭔가를 얻어내고자 하는 성격이다.

에바 라 루 (Eva La Rue) - 나탈리아 보아 비스타 , 1급 감식 수사관 (시즌 4 ~ )
전문 분야는 미해결 사건과 DNA 분석으로 前 FBI 수사관 출신요원이며 시즌 5에서 전 남편과는 이혼하였다.

렉스 린 (Rex Linn) - 프랭크 트립 , 마이애미 데이드 경찰 강력계 형사.
호레시오 케인 반장의 친구 겸 CSI 시리즈에서 빠질 수 없는 형사 캐릭터로 두리두리한 체구의 소유자로 친구를 감싸주는 의리가 있다.

칸디 알렉산더 (Khandi Alexander) - 알렉스 우즈 , 前 검시관, 현 병원 응급실 레지던트.
의학대학 재학 시절 그녀는 학교에서 수석을 다투는 우등생이었다. 처음 보는 사람들은 시체에 말을 거는 그녀의 태도를 보고 정신나간 것으로 생각하기도 하지만, 그녀에게 모든 시체는 환자일 뿐이다. 누구보다 자신의 일을 사랑하고, 남에게 너그럽지만, 일에는 빈틈없는 성격이다. 시즌 6에서 불미스러운 일로 과학수사대에서 퇴직을 하였지만, 시즌 7, 8에서는 응급실 레지던트로 일하고 있다.

메갈린 에치쿤워크 (Megalyn Ann Echikunwoke)- 타라 프라이스, 前 검시관 (시즌 7)
시즌 6에서 퇴임한 알렉스 후임으로 들어온 검시관이었으나 시즌 7 마지막에서 불미스러운 사건으로 결국 구속되었다.

크리스찬 클레멘슨 (Christian Clemenson) 톰 로먼, 검시관 (시즌 8 ~ )
시즌 7에서 불미스러운 일로 구속된 검시관 타라 프라이스의 후임으로 들어온 남자 검시관이다. 무시무시한 검시소 분위기 속에서도 본인은 이 일에 만족해 하면서 사건을 처리한다. 에피소드 "Kill Clause"에서는 검시해야 할 시체가 해부용으로 학교에 안치된 것을 순간적으로 역이용해 공개 검시 강의를 펼치며 순조로운 수사 진행을 이끌었다.

소피아 밀로스 (Sofia Milos) - 엘리나 살라스, 레이먼드 케인의 아내 (시즌 2 ~ 시즌 7).
 정신장애가 있으며 엘리나 역시 경찰이라 시아주버니인 호레시오와 러브라인이 조성될 뻔하다가 마리솔의 등장으로 러브라인이 조성되지는 못했다. 하지만 묘한 감정을 주고 받은 두 사람인 것은 사실이다.

킴 덜레이니 (Kim Delaney) - 메간 도너, 1급 감식 수사관 (시즌 1).
前 마이애미 데이드 범죄 수사국 주간 부문 국장(후임자가 케인 반장.)으로 활동했었으나 남편이 살인사건에 관련된 것에 충격을 받아 급히 퇴직하여 종적을 감춘 상태이다. 다른 수사관들과 관계상 약간의 마찰이 있었다.

데이비드 리 스미스 (David Lee Smith) - 릭 스테틀러, 내사과 형사 (시즌 2 ~ 8)
 호레시오와 같은 SWAT 경찰 특공대 출신이며 경찰 특공대에 있을때 폭탄 전문가이었다. 시즌 8 마지막에서 레베카 네빈스 플로리다 주 검사를 살해하고 증거물 보관소에 있던 압수된 보석을 밀반출과 압수된 차량을 몰래 밀반출한 자신의 일을 전부 다 라이언이 한짓으로 만들려다 이 일에 연루된 한 순경이 이 일과 관련된 범인을 지목하여 자신의 범행이 드러나자 그는 구속되었다. 

크리스티나 창 (Christina Chang) - 레베카 네빈스, 플로리다 주 검찰청 검사 (시즌 3, 시즌 6, 시즌 8)
호레시오와 깊은 친분관계를 가진 플로리다 주 검찰청의 여검사였다. 시즌 8에서 에릭은 과학수사대를 떠나 있는 동안 레베카 검사 밑에서 일을 하였다. 증거물 보관소에 있던 압수된 물품들이 하나 둘씩 없어지는 것에 대한 수사를 하던도중 에릭을 만나려고 하는 순간 차량이 폭파하는 바람에 그녀는 순직하였다.